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堿性磷酸酶(ALP)檢測試劑盒5

簡要描述:產品概述 product description 堿性磷酸酶(Alkaline phosphatase,簡稱ALP或AKP)是廣泛分布于人體肝臟、骨骼、腸、腎和胎盤等組織經肝臟向膽外排出的一種酶。這種酶能催化核酸分子脫掉5’磷酸基團,從而使DNA或RNA片段的5’-P末端轉換成5’-OH末端。 貝博TM BBcellProbe® (磷酸苯二鈉法)(Alkaline Phosphatase Colorimetric Assay Kit)采用磷酸苯二鈉比色法,其檢測原理是磷酸苯二鈉在堿性條件下,可在堿性磷酸酶的作用下生成游離酚和磷酸,通過酶標儀測定510nm處吸光度,據此通過比色分析就可以計算出堿性磷酸酶活性水平。 本試劑盒可用于檢測細胞或組織的裂解液或勻漿液、血漿、血清等樣品中內源性的堿性磷......

  • 產品型號:
  • 廠商性質:生產廠家
  • 更新時間:2025-01-10
  • 訪  問  量:176

詳細介紹

保存溫度
2-8℃ 避光
注意事項
開蓋后組份按要求條件保存。
有效期
6個月
檢測方法
分光光度計
適用樣本
血清血漿/組織/細胞
產品應用
分光光度計
儀器準備
1.可見分光光度計
2.恒溫水浴鍋
3.離心機
4.漩渦混勻器
5.移液器
試劑準備
1.純水
耗材準備
1.離心管
2.吸頭
使用注意事項
1.待測樣品中不能含有磷酸酶抑制劑。
2.樣品避免反復凍融。
3.如果沒有分光光度計,也可以使用酶標儀測定。
4.所測樣本的值高于標準曲線的上限,應稀釋樣品后重新測定。
5.空白管如果顯紅色,說明ALP顯色液不可用,應丟棄。
6.加入顯色基液時,應迅速,并且及時混勻,否則顯色不充分。
使用方法
樣品測定:
1. 配制標準品工作液
取出試劑D:標準品1mg/ml恢復至室溫后,取0.1ml溶解于1.9ml的試劑E:ddH2O中,使濃度為0.05mg/ml,即為標準品工作液。
參照下表稀釋系列標準品溶液

2. 樣品準備:
1) 細胞或組織樣品:取恰當細胞或組織裂解液,如有必要需適當勻漿;低速離心取上清,-80℃凍存,用于堿性磷酸脂酶的檢測;
2) 血漿、血清和尿液樣品:血漿、血清按照常規方法制備后可以直接用于本試劑盒的測定;尿液通常也可以直接用于測定,-80℃凍存,但為了消除樣品本身顏色的干擾,需設置加了血漿或血清但不加底物的對照;
3) 高活性樣品:如果樣品中含有較高活性的堿性磷酸酶,可以使用原有的裂解液或PBS等進行稀釋,如雞血清、血漿可稀釋5~10倍后檢測。

3. 加樣:
依照下表設置空白管、標準管、測定管,溶液應按照順序依次加入,并注意避免氣泡的產生。如果樣品中的堿性磷酸酯酶活性過高,可以減少樣品用量或適當稀釋后再測定。樣品的檢測能設置平行管。
立即混勻,510nm,0號管(ddH2O)調零,測各管吸光度。

計算公式:
堿性磷酸酶金氏活性單位的定義:
在37℃條件下,100ml待測樣品與顯色底物(即ALP顯色液所含物質)作用15分鐘,產生1mg酚為一個金氏單位。

以系列標準品工作液(1~5號管)對應的金氏單位為X軸,以相應的標準管吸光度(1~5號管)為Y軸,繪制標準曲線。

以測定管與空白管的吸光度值的差額為實際的吸光度,用該差值與標準曲線進行對比,算出酶活力單位。

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