堿性磷酸酶（ALP）檢測試劑盒5

簡要描述：產品概述 product description 堿性磷酸酶(Alkaline phosphatase，簡稱ALP或AKP)是廣泛分布于人體肝臟、骨骼、腸、腎和胎盤等組織經肝臟向膽外排出的一種酶。這種酶能催化核酸分子脫掉5’磷酸基團，從而使DNA或RNA片段的5’-P末端轉換成5’-OH末端。貝博TM BBcellProbe® (磷酸苯二鈉法)(Alkaline Phosphatase Colorimetric Assay Kit)采用磷酸苯二鈉比色法，其檢測原理是磷酸苯二鈉在堿性條件下，可在堿性磷酸酶的作用下生成游離酚和磷酸，通過酶標儀測定510nm處吸光度，據此通過比色分析就可以計算出堿性磷酸酶活性水平。本試劑盒可用于檢測細胞或組織的裂解液或勻漿液、血漿、血清等樣品中內源性的堿性磷......

產品型號：
廠商性質：生產廠家
更新時間：2025-01-10
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細胞分析

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詳細介紹

保存溫度

2-8℃ 避光

注意事項

開蓋后組份按要求條件保存。

有效期

6個月

檢測方法

分光光度計

適用樣本

血清血漿/組織/細胞

產品應用

分光光度計

儀器準備

1.可見分光光度計
2.恒溫水浴鍋
3.離心機
4.漩渦混勻器
5.移液器

試劑準備

1.純水

耗材準備

1.離心管
2.吸頭

使用注意事項

1.待測樣品中不能含有磷酸酶抑制劑。
2.樣品避免反復凍融。
3.如果沒有分光光度計，也可以使用酶標儀測定。
4.所測樣本的值高于標準曲線的上限，應稀釋樣品后重新測定。
5.空白管如果顯紅色，說明ALP顯色液不可用，應丟棄。
6.加入顯色基液時，應迅速，并且及時混勻，否則顯色不充分。

使用方法

樣品測定：
1. 配制標準品工作液
取出試劑D：標準品1mg/ml恢復至室溫后，取0.1ml溶解于1.9ml的試劑E：ddH2O中，使濃度為0.05mg/ml，即為標準品工作液。
參照下表稀釋系列標準品溶液

2. 樣品準備：
1) 細胞或組織樣品：取恰當細胞或組織裂解液，如有必要需適當勻漿；低速離心取上清，-80℃凍存，用于堿性磷酸脂酶的檢測；
2) 血漿、血清和尿液樣品：血漿、血清按照常規方法制備后可以直接用于本試劑盒的測定；尿液通常也可以直接用于測定，-80℃凍存，但為了消除樣品本身顏色的干擾，需設置加了血漿或血清但不加底物的對照；
3) 高活性樣品：如果樣品中含有較高活性的堿性磷酸酶，可以使用原有的裂解液或PBS等進行稀釋，如雞血清、血漿可稀釋5~10倍后檢測。

3. 加樣：
依照下表設置空白管、標準管、測定管，溶液應按照順序依次加入，并注意避免氣泡的產生。如果樣品中的堿性磷酸酯酶活性過高，可以減少樣品用量或適當稀釋后再測定。樣品的檢測能設置平行管。
立即混勻，510nm，0號管（ddH2O）調零，測各管吸光度。

計算公式：
堿性磷酸酶金氏活性單位的定義：
在37℃條件下，100ml待測樣品與顯色底物（即ALP顯色液所含物質）作用15分鐘，產生1mg酚為一個金氏單位。

以系列標準品工作液（1~5號管）對應的金氏單位為X軸，以相應的標準管吸光度（1~5號管）為Y軸，繪制標準曲線。

以測定管與空白管的吸光度值的差額為實際的吸光度，用該差值與標準曲線進行對比，算出酶活力單位。

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