細菌蛋白提取試劑盒（免超聲）

簡要描述：產品概述 product description 貝博® BBproExtra® 細菌總蛋白提取試劑盒可以從各種菌體中提取總蛋白，包括革蘭氏陽性和革蘭氏陰性細菌，可用于純化蛋白的粗品制備及總蛋白制備。提取過程簡單方便。該試劑盒含有蛋白酶抑制劑混合物和磷酸酶抑制劑混合物，阻止了蛋白酶對蛋白的降解，為提取高質量的蛋白提供了保證。本試劑盒提取的蛋白可用于Western Blotting、蛋白質電泳等下游蛋白研究實驗。本試劑盒提取的蛋白為不具有天然活性的蛋白。本試劑盒中不含有EDTA，與金屬螯和層析等下游應用兼容。本試劑盒提取的蛋白樣本含有高濃度的鹽成

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廠商性質：生產廠家
更新時間：2025-01-10
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蛋白質生物學

蛋白提取和裂解細胞器分離蛋白純化蛋白質濃縮和緩沖液置換蛋白定量蛋白凝膠電泳免疫組織化學查看全部產品

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詳細介紹

保存溫度

2-8℃

注意事項

1.蛋白酶抑制劑未開蓋使用前也可以2-8℃儲存。開蓋使用后-20℃儲存。 2.蛋白酶抑制劑在2-8℃低溫時是固體狀態，從冰箱取出后恢復至室溫或37℃短時間水浴，變成液體狀態后離心至管底部再開蓋。 3.試劑拆封后請盡快使用完！

有效期

一年

檢測方法

WB,IP等

適用樣本

細菌

產品特點

1.使用方便：不需昂貴設備。 2.可以處理各種細菌菌體，包括新鮮菌液和冰凍菌體。 3.將蛋白提取的時間縮短至30分鐘-1小時。 4.采用溫和的中性裂解組分，保持蛋白活性。 5.含蛋白穩定劑，提取的蛋白穩定。 6.紫外檢測蛋白濃度時，背景干擾低。 7.蛋白酶抑制劑抑制了蛋白的降解，蛋白酶抑制劑配方優化。蛋白酶抑制劑混合物包含6種獨立的蛋白酶抑制劑；每一種抑制劑可特異性抑制某一種或幾種蛋白酶活性。該混合物優化的組成使其可以抑制幾乎所有重要的蛋白酶活性，包括蛋白酶、半酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶、丙氨酰-氨基肽酶等。 8.本試劑盒中不有EDTA，與金屬螯和層析等兼容。

產品應用

WB,IP等

儀器準備

1.離心機 2.振蕩器 3..渦旋混勻器 4.移液器 5..冰箱 6.冰盒

試劑準備

1.PBS緩沖液 2.蛋白定量試劑盒

耗材準備

1.離心管 2.吸頭 3.一次性手套

使用注意事項

1.預實驗很重要。必須要做預實驗，在正式實驗之前取少量樣本優化實驗條件，并像正式樣本一樣認真進行，看實驗結果是否可行，實驗條件是否適合自己的樣本。由于生物樣本的多樣性，不同樣本的實驗條件通常差異較大，同種細胞的不同模型下需要的實驗條件也可能不同，為了避免浪費正式樣本和試劑，一定要提前預實驗優化實驗條件。 2.旋帽離心管裝的試劑在開蓋前請短暫離心，將蓋內壁上的液體甩至管底，避免開蓋時液體灑落。 3.實驗過程中的所有試劑須預冷；所有器具須放-20℃冰箱預冷。整個過程須保持樣品處于低溫。 4.蛋白酶抑制劑儲存期間溶液如果出現沉淀，不影響使用，溶解后正常使用。 5.可以根據自己實驗需要加入其它蛋白酶抑制劑單品。 6.本試劑盒中提取液和蛋白酶抑制劑中均不含EDTA，根據需要可自行加入。

使用方法

1.提取液的準備：根據所需要提取的樣本量，每500 μl裂解液中加入2 μl蛋白酶抑制劑混合物和2 μl磷酸酶抑制劑混合物和5 μl蛋白穩定液，充分混勻后置冰上備用。 2.在4℃， 10000×g條件下將菌液離心5 min，棄上清，盡量吸干剩余液體，收集菌體。 3.用PBS洗菌體一次。若為冷凍菌體直接進行下面操作步驟即可。 4.按每50-100 mg濕重菌體樣本加入250-500 μl提取液，吹打混勻，2-8℃振蕩45-60分鐘。 5.在4℃， 12000×g條件下將菌液離心5分鐘，將上清移入冷的干凈離心管。 6.即得到細菌總蛋白樣品。 7.將總蛋白樣品定量后分裝置于-80℃冰箱或直接用于下游實驗。

常見問題分析

1.蛋白濃度低？處理部分樣本時可能沒有裂解，導致蛋白濃度低。只要適當延長試劑A的處理時間即可。在持續振蕩的條件下處理，沒有振蕩器也可間隔幾分鐘用吸頭吹打混勻。有些革蘭氏陽性菌可能較難裂解，有條件的話進行超聲處理。 2.用什么方法定量蛋白？建議用BCA法。不適合用Bradford法，因為試劑A中含有干擾Bradford法的組份，導致定量不準。如果已經進行過透析處理或者用脫鹽柱改換過緩沖體系，則可以用Bradford法定量。 3.提取時出現膠狀沉淀？蛋白提取液處理產物中有時會出現少量透明膠狀物，屬正常現象。該透明膠狀物為含有基因組DNA等的復合物。不檢測和基因組DNA結合特別緊密的特定蛋白的情況下，可以直接離心取上清進行后續實驗即可；如果需要檢測和基因組結合特別緊密的蛋白，則可以通過超聲處理，300w/10秒間隔10秒，超聲3分鐘，隨后離心取上清用于后續實驗。 4.提取的蛋白具有活性嗎？本試劑盒含有破壞蛋白天然結構的組份，有對蛋白質之間原有的相互作用的破壞，蛋白無法保持其天然構象和活性。需要活性蛋白的可以選擇貝博其它貨號的試劑盒產品。

參考文獻

1.HaiFeng Su et al. An integrated approach combines hydrothermal chemical and biological treatment to enhance recycle of rare metals from coal fly ash Chemical Engineering Journal 2020 （IF=8.355） 2.HF Su et al. A sequential integration approach using Aspergillus Niger to intensify coal fly ash as a rare metal pool Fuel 2020 （IF=5.128） 3.H Shi et al. Highly efficient visible light driven photocatalytic inactivation of E. coli with Ag QDs decorated Z-scheme Bi2S3/SnIn4S8 composite Applied Catalysis B: Environmental 2019 （IF=11.698）

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