植物膜蛋白提取試劑盒（2D電泳用）

簡要描述：產品概述 product description 貝博TM BBproExtraTM植物膜蛋白提取試劑盒（雙向電泳用）是一種高效的高產膜蛋白提取試劑盒。植物膜蛋白提取試劑盒可以從各種植物中提取膜蛋白，可用于純化膜蛋白的粗品制備及膜蛋白制備。提取過程簡單方便。該試劑盒含有蛋白酶抑制劑混合物和磷酸酶抑制劑混合物，阻止了蛋白酶對蛋白的降解，為提取高質量的蛋白提供了保證。本試劑盒提取的蛋白用于雙向電泳。如需要用于SDS-PAGE電泳檢測、Western blotting、凝膠阻滯實驗、免疫共沉淀、報告基因檢測、酶活分析等下游實驗的試劑盒，請聯系貝博，選用其它產品號的產品（BB-3152）。

產品型號：
廠商性質：生產廠家
更新時間：2025-01-09
訪問量：124

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產品分類

CLASSIFICATION

蛋白質生物學

蛋白提取和裂解細胞器分離蛋白純化蛋白質濃縮和緩沖液置換蛋白定量蛋白凝膠電泳免疫組織化學查看全部產品

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詳細介紹

保存溫度

2-8℃

注意事項

1.蛋白酶抑制劑未開蓋使用前也可以2-8℃儲存。開蓋使用后-20℃儲存。
2.蛋白酶抑制劑在2-8℃低溫時是固體狀態，從冰箱取出后恢復至室溫或37℃短時間水浴，變成液體狀態后離心至管底部再開蓋。
3.試劑拆封后請盡快使用完！

有效期

一年

檢測方法

雙向電泳

適用樣本

植物

產品特點

1、使用方便。
2、含蛋白穩定劑，提取的蛋白穩定。
3、紫外檢測蛋白濃度時，背景干擾低。
4、蛋白酶抑制劑抑制了蛋白的降解，蛋白酶抑制劑配方優化。蛋白酶抑制劑混合物包含7種獨立的蛋白酶抑制劑；每一種抑制劑可特異性抑制某一種或幾種蛋白酶活性。該混合物優化的組成使其可以抑制幾乎所有重要的蛋白酶活性，包括蛋白酶、半酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶、丙氨酰-氨基肽酶等。

產品應用

雙向電泳

儀器準備

1.離心機
2.振蕩器
3.渦旋混勻器
4.移液器
5.冰箱
6.冰盒

試劑準備

1.PBS緩沖液
2.蛋白定量試劑盒

耗材準備

1.離心管
2.吸頭
3.一次性手套

使用注意事項

使用注意事項：
? 旋帽離心管裝的試劑在開蓋前請短暫離心，將蓋內壁上的液體甩至管底，避免開蓋時液體灑落。
? 蛋白酶抑制劑在2-8℃時是固體狀態，從冰箱取出后恢復至室溫或37℃短時間水浴，變成液體狀態后離心至管底部再開蓋。
? 實驗過程中的所有試劑須預冷；所有器具須放-20℃冰箱預冷。整個過程須保持樣品處于低溫。
? 蛋白酶抑制劑儲存期間溶液如果出現沉淀，不影響使用，溶解后正常使用。
? 如果試劑盒不能短時間內用完，蛋白酶抑制劑混合物不可以一次全部加入提取液。
? 可以根據自己實驗需要加入其它蛋白酶抑制劑單品。
?

使用方法

1、試劑準備：
每500ul膜提取液A中加入2ul蛋白酶抑制劑混合物，充分混勻后置冰上備用。
2、取洗凈擦干后并去除葉梗和粗脈的200mg植物組織樣本用刀盡可能剪碎。
3、加入500ul冷的提取液A，用組織勻漿機/勻漿器充分勻漿。
4、勻漿后移入一個干凈離心管中在2-8℃振蕩1-2小時。
5、將提取液在2-8℃條件下12000g離心5分鐘，取上清。
6、在上清中加入5ul提取液B，充分混勻。
7、在37℃水浴10分鐘。
8、在37℃， 1000g離心3分鐘。
9、此時液體分為2層，小心移除上層部分，吸取下層管底部大約50ul液體。
10、用50-150μl冷的膜蛋白溶解液C溶解下層溶液，即得膜蛋白樣品。
11、將上述蛋白提取物定量后分裝于-80℃冰箱保存備用或直接用于下游實驗。

常見問題分析

1.蛋白濃度低？
膜蛋白豐度較低，需要盡可能加大細胞上樣量。處理部分組織樣本時可能沒有裂解，導致蛋白濃度低。只要適當延長試劑A的處理時間即可。在持續振蕩的條件下處理，沒有振蕩器也可間隔幾分鐘用吸頭吹打混勻。
2.用什么方法定量蛋白？
建議用BCA法。不適合用Bradford法，因為試劑A中含有干擾Bradford法的組份，導致定量不準。如果已經進行過透析處理或者用脫鹽柱改換過緩沖體系，則可以用Bradford法定量。
3.提取的蛋白具有活性嗎？
本試劑盒不含有離子型去垢劑組份，不破壞蛋白的結構，沒有對蛋白質之間原有的相互作用的破壞，蛋白均保持其天然構象和活性。

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