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RIPA裂解液（不含triton x-100）

簡要描述：產品概述 product description 貝博RIPA裂解液采用優質原料配制，對動物細胞胞膜、胞漿、胞核成分均有較強裂解作用，是經典常用的細胞組織快速裂解液。RIPA裂解液裂解得到的蛋白樣品可以用于常規的Western、IP等下游實驗。本RIPA裂解液成分為25mM Tris?HCl pH 7.6, 150mM NaCl, 1% NP-40, 1% sodium deoxycholate, 0.1% SDS。根據相應實驗要求添加自己需要的蛋白酶抑制劑和磷酸酶抑制劑。

產品型號：
廠商性質：生產廠家
更新時間：2025-01-09
訪問量：119

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產品分類

CLASSIFICATION

蛋白質生物學

蛋白提取和裂解細胞器分離蛋白純化蛋白質濃縮和緩沖液置換蛋白定量蛋白凝膠電泳免疫組織化學查看全部產品

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詳細介紹

保存溫度

2-8℃

注意事項

1.試劑拆封后請盡快使用完！

有效期

1年

檢測方法

WB、IP等

適用樣本

細胞、組織

產品應用

WB、IP等

儀器準備

1.離心機
2.振蕩器
3.渦旋混勻器
4.移液器
5.冰箱
6.冰盒 7.勻漿機/勻漿器

試劑準備

1.PBS緩沖液（pH7.4，實驗室常用的10mM磷酸緩沖鹽溶液（1X））（phosphate buffer saline/Dulbecco’s PBS：約含8mM Na2HPO4、2mM KH2PO4、137mM NaCl和3mM KCl）
2.蛋白定量試劑盒

耗材準備

? 離心管
? 吸頭
? 一次性手套

使用注意事項

1.實驗過程中的所有試劑須預冷；所有器具須放-20℃冰箱預冷。
2.整個過程須保持樣品處于低溫狀態。
3.本試劑盒僅供科學研究使用，不可用于診斷或治療。
4.螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心，將蓋和管內壁上的液體離心至管底，避免開蓋時試劑損失。
5.禁止與其他品牌的試劑混用，否則會影響使用效果。
6.使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿，可重復使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并清除殘留清潔劑。
7.避免皮膚或粘膜與試劑接觸。

使用方法

A．細胞裂解
1. 取5-10×106個細胞，在4℃，1000rpm條件下離心5-10分鐘，小心吸取培養基，盡可能吸干，收集細胞。
2. 用冷PBS洗滌細胞兩次，每次洗滌后盡可能吸干上清。
3. 每5×106個細胞中加入500ul冷的裂解液（每106個細胞，大約10mg或10ul壓積，加100ul RIPA裂解液。大約相當于6孔板的每孔加入100ul~150ul，或一個75 cm2培養瓶加1 ml。裂解液和細胞應充分接觸。如果RIPA裂解液不足量，細胞裂解效率將會降低），混勻后，在4℃條件下振蕩15-20分鐘。
4. 在4℃，14000rpm條件下離心15分鐘。
5. 快速將上清吸入另一預冷的干凈離心管，用于下游實驗。

B．組織裂解
1. 取100mg組織樣本剪碎，加入1ml裂解液，用組織勻漿器勻漿至無明顯肉眼可見固體。
2. 將組織勻漿吸入另一預冷的干凈離心管中，在4℃，10000rpm條件下離心5分鐘。
3. 將上清吸入另一預冷的干凈離心管，用于下游實驗。

上述蛋白提取物可分裝后于-80℃冰箱保存備用。

產品咨詢

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