SDS裂解液

簡要描述：產品概述 product description 貝博SDS裂解液采用優質原料配制，對動物細胞胞膜、胞漿、胞核成分均有較強裂解作用，是經典常用的細胞組織快速裂解液。SDS裂解液裂解得到的蛋白樣品可以用于常規的Western、IP等下游實驗。貝博SDS裂解液中已含常用磷酸酶抑制劑。

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廠商性質：生產廠家
更新時間：2025-01-09
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蛋白質生物學

蛋白提取和裂解細胞器分離蛋白純化蛋白質濃縮和緩沖液置換蛋白定量蛋白凝膠電泳免疫組織化學查看全部產品

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詳細介紹

保存溫度

2-8℃

注意事項

1.蛋白酶抑制劑未開蓋使用前也可以2-8℃儲存。開蓋使用后-20℃儲存。
2.蛋白酶抑制劑從冰箱取出后恢復至室溫或37℃短時間水浴，變成液體狀態后離心至管底部再開蓋。
3.試劑拆封后請盡快使用完！

有效期

1年

檢測方法

WB、IP等

適用樣本

細胞、組織

產品應用

WB、IP等

儀器準備

1.離心機
2.振蕩器
3.渦旋混勻器
4.移液器
5.冰箱
6.冰盒 7.勻漿機/勻漿器

試劑準備

1.PBS緩沖液（pH7.4，實驗室常用的10mM磷酸緩沖鹽溶液（1X））（phosphate buffer saline/Dulbecco’s PBS：約含8mM Na2HPO4、2mM KH2PO4、137mM NaCl和3mM KCl）
2.蛋白定量試劑盒

耗材準備

? 離心管
? 吸頭
? 一次性手套

使用注意事項

1.旋帽離心管裝的試劑在開蓋前請短暫離心，將蓋內壁上的液體甩至管底，避免開蓋時液體灑落。
2.實驗過程中的所有試劑須預冷；所有器具須放-20℃冰箱預冷。整個過程須保持樣品處于低溫。
3.蛋白酶抑制劑儲存期間溶液如果出現沉淀，不影響使用，溶解后正常使用。
4.如果試劑盒不能短時間內用完，蛋白酶抑制劑混合物不可以一次全部加入提取液。
5.可以根據自己實驗需要加入其它蛋白酶抑制劑單品。
6.下游實驗如果是進行特定蛋白酶或磷酸酶的酶活性檢測，提取液可以不加蛋白酶抑制劑或磷酸酶抑制劑，注意提取過程保持低溫操作，縮短離心時間。

使用方法

A．細胞裂解
1. 裂解液制備：每1ml冷的SDS裂解液中加入4ul蛋白酶抑制劑混合物，混勻后置冰上備用。
2. 取5-10×106個細胞，在4℃，1000rpm條件下離心5-10分鐘，小心吸取培養基，盡可能吸干，收集細胞。
3. 用冷PBS洗滌細胞兩次，每次洗滌后盡可能吸干上清。
4. 每5×106個細胞中加入500ul冷的裂解液（每106個細胞加100ul SDS裂解液。大約相當于6孔板的每孔加入100ul~150ul，或一個75 cm2培養瓶加1~2 ml。裂解液和細胞應充分接觸。如果SDS裂解液不足量，細胞裂解效率將會降低），混勻后，在4℃條件下振蕩15-20分鐘。
5. 在4℃，14000rpm條件下離心15分鐘。
6. 快速將上清吸入另一預冷的干凈離心管，用于下游實驗。

B．組織裂解
1. 裂解液制備：每1ml冷的SDS裂解液加入4ul蛋白酶抑制劑混合物，混勻后置冰上備用。
2. 取100mg組織樣本剪碎，加入1ml裂解液，用組織勻漿器勻漿至無明顯肉眼可見固體。
3. 將組織勻漿吸入另一預冷的干凈離心管中，在4℃，10000rpm條件下離心5分鐘。
4. 將上清吸入另一預冷的干凈離心管，用于下游實驗。

上述蛋白提取物可分裝后于-80℃冰箱保存備用。

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